目前“新型冠狀病毒肺炎”已在全球范圍內(nèi)爆發(fā)，全球累計(jì)確診已超過(guò)300萬(wàn)人口，作為“新型冠狀病毒”檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn)的核酸檢測(cè)試劑盒供不應(yīng)求；試劑盒中用于檢測(cè)樣本前處理的重要組分，蛋白酶K更是“一K難求”。
圖1 蛋白酶K三維結(jié)構(gòu)
蛋白酶K的應(yīng)用
蛋白酶K在體外診斷、藥物加工等生物醫(yī)藥領(lǐng)域有著不可替代的重要作用。
在核酸提取檢測(cè)中的應(yīng)用：DNA通常纏繞在由組蛋白和其他非組蛋白形成的染色體上，很難釋放。蛋白酶K可降解與核酸緊密結(jié)合的組蛋白，將DNA與蛋白質(zhì)分離，使DNA更好的被提純；另外，蛋白酶K可降解RNA水解酶活性（Rnase），抑制Rnase水解模板RNA，在RNA的提取和檢測(cè)過(guò)程中起到不可或缺的作用。
圖2 蛋白酶K關(guān)鍵催化位點(diǎn)
在原位雜交中的應(yīng)用：蛋白酶K通常用來(lái)消化靶標(biāo)DNA周?chē)牡鞍踪|(zhì)，以便于檢測(cè)探針的穿透，提高檢測(cè)的敏感性。但是蛋白酶K的濃度和消化時(shí)間都會(huì)影響雜交效果。濃度過(guò)高或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，都會(huì)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，出現(xiàn)細(xì)胞核消失及脫片等現(xiàn)象，影響核酸的結(jié)合。
在非蛋白組分提取中的應(yīng)用：蛋白酶K可降解蛋白質(zhì)類(lèi)雜質(zhì)，更好的將目標(biāo)組分和來(lái)自生物樣本中的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離，提高產(chǎn)物的純度和生產(chǎn)效率，還可以降解內(nèi)毒素等蛋白質(zhì)類(lèi)有害成分，提高產(chǎn)品安全性。
長(zhǎng)期以來(lái)，我國(guó)無(wú)法生產(chǎn)醫(yī)藥級(jí)別的蛋白酶K，下游產(chǎn)業(yè)嚴(yán)重依賴(lài)進(jìn)口。武漢瀚海新酶生物科技有限公司是武漢光谷“3551光谷人才計(jì)劃”企業(yè)，是一家專(zhuān)業(yè)從事特種酶的研發(fā)、生產(chǎn)、應(yīng)用和技術(shù)服務(wù)的高新技術(shù)類(lèi)企業(yè)。其核心技術(shù)團(tuán)隊(duì)由海外留學(xué)人員及國(guó)內(nèi)酶工程領(lǐng)域的一流專(zhuān)家組成，建立了酶家族結(jié)構(gòu)功能關(guān)系解析與分子理性設(shè)計(jì)等三大技術(shù)平臺(tái)，在酶工程技術(shù)上實(shí)現(xiàn)了關(guān)鍵性突破，代表國(guó)內(nèi)酶工程的一流技術(shù)。
圖3 對(duì)異硫氰酸胍的耐受性
蛋白酶K生產(chǎn)工藝優(yōu)化
瀚海新酶通過(guò)生物信息學(xué)分析、分子改造等技術(shù)手段成功篩選到一株具有較高有機(jī)溶劑耐受性的蛋白酶K突變體；運(yùn)用了上海喬楓噴霧冷凍及真空攪拌等設(shè)備優(yōu)化了蛋白酶K的生產(chǎn)工藝，提升3倍生產(chǎn)效率，實(shí)現(xiàn)了蛋白酶K千克級(jí)生產(chǎn)，使其成為國(guó)內(nèi)較大的蛋白酶K生產(chǎn)商，相信蛋白酶K的及時(shí)供應(yīng)，能夠生產(chǎn)更多的核酸檢測(cè)試劑盒，為國(guó)內(nèi)外的朋友們提供更多的幫助，讓我們并肩作戰(zhàn)，共同戰(zhàn)勝新冠肺炎，早日回歸正常的生活！
圖4 真空攪拌三維立體圖
上海喬楓致力于為健康用酶、醫(yī)療用酶、生物酶提供新的生產(chǎn)工藝。
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上海喬楓實(shí)業(yè)有限公司，成立于2012年，是專(zhuān)業(yè)從事粉體干燥設(shè)備的研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售和售后于一體的綜合性公司，本公司致力于為新能源材料、精細(xì)化工、生物制藥以及食品工程等領(lǐng)域提供全套解決方案的整線交鑰匙工程企業(yè)。
公司成立了以上海交通大學(xué)和華東理工大學(xué)為主的核心研發(fā)團(tuán)隊(duì)，同時(shí)與浙江大學(xué)機(jī)械工程部等眾多科研單位進(jìn)行常年合作，取得了多項(xiàng)核心技術(shù)的突破。發(fā)明了噴霧冷凍技術(shù)，結(jié)合凍干機(jī)和噴霧干燥機(jī)的優(yōu)勢(shì)，比凍干機(jī)提升了3倍生產(chǎn)效率；運(yùn)用DACTS 3干風(fēng)原理，在國(guó)內(nèi)首次實(shí)現(xiàn)35℃的低溫噴霧干燥，為熱敏性物料的干燥提供了新工藝，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用到生物制藥和植物提取等領(lǐng)域。同時(shí)上海喬楓研發(fā)了超細(xì)粉末噴霧干燥機(jī)，可以生產(chǎn)300納米-20微米的超細(xì)粉末粒子，填補(bǔ)了國(guó)內(nèi)技術(shù)空白，為有超細(xì)粉末需求的客戶(hù)提供了良好的的解決方案。
